產(chǎn)品參數(shù)靈敏度檢測范圍0.625pg/ml3.125–200pg/ml本試劑盒適用于血清、血漿、組織勻漿、細胞培養(yǎng)上清及其它生物體液。 檢測原理上海威奧生物科技有限公司生產(chǎn)的 ELISA 試劑盒采用“夾心法”:將捕獲抗體包被于酶標板上，捕獲樣品及標準品中的靶蛋白，生物素化的檢測抗體與靶蛋白結(jié)合， SABC 復合物與生物素化檢測抗體結(jié)合，形成免疫復合物，加入TMB 顯色液后，若反應孔中有靶蛋白則顯藍
靈敏度 | 檢測范圍 |
0.625pg/ml | 3.125–200pg/ml |
本試劑盒適用于血清、血漿、組織勻漿、細胞培養(yǎng)上清及其它生物體液。
上海威奧生物科技有限公司生產(chǎn)的 ELISA 試劑盒采用“夾心法”:將捕獲抗體包被于酶標板上，捕獲樣品及標準品中的靶蛋白，生物素化的檢測抗體與靶蛋白結(jié)合， SABC 復合物與生物素化檢測抗體結(jié)合，形成免疫復合物，加入TMB 顯色液后，若反應孔中有靶蛋白則顯藍色，加入終止液變黃色，檢測過程中游離的成分均被洗去，用酶標儀在 450 nm 處測 OD 值，靶蛋白濃度與OD 值之間呈正比，通過繪制標準曲線計算出標本中靶蛋白的濃度。
1.血清、血漿樣本收集應使用一次性的無熱原，無內(nèi)毒素試管（EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝均可），血清、血漿避免使用溶血，高血脂標本，標本懸浮物應離心去除，使標本清澈透明。待測樣本應盡早檢測，2-8℃保存48小時；更長時間須冷凍（-20℃或-80℃）保存，避免反復凍融。
2.洗滌液配置：用蒸餾水1:20稀釋（例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的蒸餾水）
3.標準品配制：取8個1.5ml離心管，分別標注S1,S2,S3,S4,S5,S6,S7,blank,第一管S1中加入標準品/樣品稀釋液900ul，第二至第八管中分別加入標準品/樣品稀釋液200ul，在第一管中加入(500ng/ml)標準品溶液100ul置于漩渦混合器上混勻后用加樣器吸出200ul，移至第二管，如此反復作對倍稀釋，從第七管中吸出200ul棄去，第八管為空白對照。
4.生物素化抗體工作液配置:使用前20分鐘，用生物素化抗體稀釋液將100×生物素化抗體稀釋成1×工作液，根據(jù)所需用量配置，當日使用，剩余棄之。
5.TMB顯色液的配置：使用前10分鐘，將TMB顯色液A液和B液1：1混合，避光放置備用。
6.如果您檢測的樣本中靶蛋白濃度高于標準品最高值，建議重新檢測，請根據(jù)實際情況，適當倍數(shù)稀釋(建議做預實驗，以確定稀釋倍數(shù))。
1.加樣∶空白孔加入50ul標準品/樣品稀釋液，其余孔各加入標準品或待測樣品50ul，將反應板混勻后置37℃，40分鐘。
2.洗板∶用1×洗滌液將反應板充分洗滌4-6次，每孔加入1×洗液350ul，每次震蕩/浸泡1-2分鐘，向濾紙上印干。
3.空白孔加入100ul生物素化抗體稀釋液，其余孔各加入1*的生物素化抗體工作液100ul，混勻后置37℃，30分鐘。
4.洗板︰同上。
5.每孔加入SABC復合物工作液10Oul，混勻后置37℃，20分鐘。
6.洗板︰同上。
7.每孔加入提前配置好的TMB混合液100ul，混勻后置37℃暗處反應10-20分鐘(具體顯色時間根據(jù)顯色結(jié)果而定)。
8.每孔加入100ul終止液，混勻，30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。
1.在試驗中標準品和樣本檢測時建議作雙孔檢測，每次檢測都應做標準曲線。
2.洗滌過程很關(guān)鍵，洗滌不充分將導致精確度誤差及OD值錯誤地升高，從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶屬于正常現(xiàn)象，37℃水浴使結(jié)晶完全溶解后再配制洗滌液。
3.檢測時所有試劑都要恢復到室溫，板條開封后剩余板條需封好，放回袋中1個月內(nèi)用完。
4.試劑盒使用超敏TMB溶液，顯色過深時會出現(xiàn)沉淀狀，屬正?，F(xiàn)象，混勻即可，不影響結(jié)果判讀。
5.說明書以試劑盒內(nèi)紙質(zhì)版為準,本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷!